NeoCHROM-STEROIDS хроматографы
Газ хроматографиясы–масс-спектрометрия (ГХ-МС) әдісімен стероидомика
NeoCHROM-STEROIDS — in vitro диагностикаға арналған медициналық бұйым (IVD) мәртебесі расталған газ-хроматографиялық кешен. Шешім биологиялық үлгілердің стероидтық профилін зерттеуге арналған және масс-спектрометриялық немесе жалынды-иондану детекторымен жабдықталуы мүмкін. Панель құрамы, үлгі түрі және сынама дайындау әдістемесі аналитикалық міндетке сәйкес анықталып, валидация кезінде расталады.
Стероидтық профиль зертханаға бір гормон нәтижесінен көбірек ақпарат береді. Гормондарды, олардың ізашарлары мен метаболиттерін бір мезгілде зерттеу стероидогенез жолдарының өзара байланысын бақылауға және кешенді клиникалық түсіндіруге арналған деректер алуға көмектеседі.
ГХ-МС әдісімен сапалық және сандық талдау
Кеңейтілген стероидтық профильге арналған заманауи шешімдер масс-спектрометриялық детекторлауы бар газ хроматографиясын қолданады. ГХ-МС құрылымы ұқсас қосылыстарды бөледі, оларды ұсталу уақыты мен масс-спектрі бойынша сәйкестендіруге және калибрлеу арқылы концентрацияларын анықтауға көмектеседі. Бұл тек хроматографиялық шың бойынша ажырату қиын стероидтық изомерлер үшін ерекше маңызды.
Жекелеген аналиттердің концентрацияларымен қатар әдістеме метаболиттер арасындағы арақатынастарды есептеуді көздеуі мүмкін. Олар стероидогенездің жекелеген жолдарындағы өзгерістерді бағалауға көмектеседі. Нысаналы әдістемелер үшін кешен жалынды-иондану детекторымен (ЖИД) де жабдықталуы мүмкін.
Несептің стероидтық профилі
Несеп үшін стероид метаболиттерінің кеңейтілген панелі перспективалы бағыт болып табылады. Жарияланған ГХ-МС әдістемелері бес топқа жататын 32 қосылысты бір мезгілде анықтауды көрсетеді:
- Прогестагендер және олардың метаболиттері: 17-гидроксипрегнанолон, прегнандиол, прегнентриол, прегнантриолон, прегнантриол.
- Минералокортикоидтық жол: тетрагидро-11-дезоксикортикостерон, 5α-тетрагидрокортикостерон, тетрагидрокортикостерон, тетрагидро-11-дегидрокортикостерон.
- Глюкокортикоидтар және олардың метаболиттері: 11-кетоэтиохоланолон, 11β-гидроксиэтиохоланолон, тетрагидро-11-дезоксикортизол, тетрагидрокортизон, тетрагидрокортизол, 5α-тетрагидрокортизол, β-кортол, α-кортолон, β-кортолон, α-кортол, кортизол, 20α-дигидрокортизол.
- Андрогендер және олардың метаболиттері: 5α-андростандиол, андростерон, Δ5-андростендиол, этиохоланолон, дегидроэпиандростерон (ДГЭА), 11β-гидроксиандростерон, 16α-гидрокси-ДГЭА, андростентриол.
- Эстрогендер: эстрон, эстриол, 17β-эстрадиол.
Бұл тізім панельді әзірлеуге негіз болады. Аналиттердің түпкілікті жиынтығы мен олардың сандық анықтау шектері NeoCHROM-STEROIDS әдістемесі үшін валидация кезінде расталады.
Қан сарысуының стероидтық профилі
Қан сарысуын зерттеу басқа аналитикалық міндетті ашады: айналымдағы гормондарды, олардың ізашарлары мен айналу өнімдерін анықтау. Бір квадрупольді ГХ-МС мүмкіндіктері 54 нысаналы компоненті бар әдістемеде көрсетілген: 26 андроген, 9 эстроген, 5 прогестаген, 6 кортикоид және 8 стерол.
Сарысу панелін қалыптастыруға негіз болатын аналиттер тізіміне мыналар кіреді:
- Андрогендер және олардың метаболиттері: тестостерон, эпитестостерон, андростендион, дегидроэпиандростерон (ДГЭА), андростерон, этиохоланолон, 6β-гидроксиандростендион, 11β-гидроксиандростендион, 16α-гидроксиандростендион және 16α-гидрокси-ДГЭА.
- Эстрогендер және олардың метаболиттері: эстрон, 17β-эстрадиол, эстриол, эстрон мен эстрадиолдың 2- және 4-гидрокситуынды қосылыстары.
- Прогестагендер және ізашарлар: прегненолон, прогестерон, 17α-гидроксипрегненолон, 17α-гидроксипрогестерон және 21-гидроксипрегненолон.
- Кортикоидтар және олардың метаболиттері: кортизол, кортизон, 11-дезоксикортизол, 6β-гидроксикортизол және 6β-гидроксикортизон.
- Стеролдар: холестерин, 7α-гидроксихолестерин, 7β-гидроксихолестерин, 4β-гидроксихолестерин, 20α-гидроксихолестерин, 24S-гидроксихолестерин және 27-гидроксихолестерин.
Бұл — кең панельдегі қосылыстардың мысалдары; NeoCHROM-STEROIDS жүйесінде барлық 54 компонентті анықтау валидациядан өтті деген мәлімдеме емес. Сарысу мен плазма үшін панель құрамы және аналитикалық сипаттамалар бөлек тексеріледі.
Үлгі түрін ескеретін сынама дайындау
Несеп әдістемесі ГХ-МС талдауы алдында экстракцияны, конъюгацияланған стероидтар гидролизін, қайта тазартуды және дериваттауды қамтуы мүмкін. Сарысу мен плазмаға бөлек тәсіл қажет: нысаналы қосылыстарды бөліп алу, матрица компоненттерінен тазарту және дериваттау. Гидролиз конъюгацияланған түрлерді анықтау міндеті болғанда қолданылады.
Сынама дайындау реттілігі аналиттер тізімімен бірге таңдалады. Валидация кезінде таңдалған үлгі түрі үшін селективтілік, қайталанғыштық және сандық анықтау шектері тексеріледі.
Талдау ұзақтығы және өнімділік
Хроматографиялық циклдің ұзақтығы 45–90 минут әдістемеге және панель құрамына байланысты. Бұл шамамен 8 сағатта 5–10 инъекцияға немесе тәулігіне 16–32 инъекцияға бір аналитикалық арнада үзілістерді есептемегенде сәйкес келеді. Нәтижелердің нақты саны сынама дайындауды, калибрлеуді, бос және бақылау үлгілерін ескере отырып жоспарланады.
Зертханаңызға қандай аналиттер мен биологиялық үлгілер қажет екенін айтыңыз. Аналитикалық міндетіңізге сай тексеру үшін панель құрамын, кешен жинақтамасын және әдістемені ұсынамыз.
Хроматографты таңдау
Талдау нысанын, компоненттерді, күтілетін концентрацияларды және нормативтік әдісті сипаттаңыз. NeoChrom инженерлері нақты аналитикалық міндетке арналған аспап жинақтамасын ұсынады.